琼脂糖凝胶电泳
按分子量大小分离核酸片段,用于检测 PCR 产物或提取的核酸质量。
从分子到蛋白,快速找到要做的实验,了解目的、原理与步骤。
按分子量大小分离核酸片段,用于检测 PCR 产物或提取的核酸质量。
用 BCA 比色法测定蛋白样品浓度,为后续电泳、免疫印迹等实验提供准确的蛋白上样量。
将处于对数生长期的细胞经程序降温后保存于液氮中,长期维持细胞活力,便于后续复苏使用。
将培养的细胞按比例稀释后接种到新培养容器中,维持细胞对数生长期,避免接触抑制与营养耗尽,为后续实验提供状态良好的细胞。
将冻存的细胞快速解冻并接种培养,恢复细胞活力与增殖能力,用于后续实验。
制备能高效摄取外源 DNA 的大肠杆菌感受态细胞,为质粒转化实验提供合格材料。
设计靶向目的基因的 sgRNA 并将其克隆到 CRISPR/Cas9 表达载体中,为基因编辑提供载体工具。
从琼脂糖凝胶中回收并纯化目标 DNA 片段,去除杂质和凝胶,供后续酶切、连接等克隆操作。
用流式细胞仪对单细胞悬液进行多参数分析,检测细胞周期、凋亡、表面标志物等,用于细胞功能研究。
用 IPTG 诱导含重组表达载体的大肠杆菌表达目的蛋白,为后续纯化与功能研究提供蛋白来源。
提取单克隆细胞的基因组 DNA,通过 PCR 扩增靶点后用 T7E1 酶切或测序,验证基因敲除/敲入是否成功。
用脂质体包裹质粒 DNA 导入真核细胞,使外源基因(如 Cas9/sgRNA)在细胞内表达,是分子到细胞的关键桥梁。
用比色法检测细胞增殖与活力,用于药物毒性、细胞增殖等实验的定量分析。
利用 His 标签与 Ni-NTA 的特异性结合,从细胞裂解液中亲和纯化带组氨酸标签的重组蛋白,获得高纯度目的蛋白。
在体外特异性扩增目标 DNA 片段,获得大量拷贝。
从大肠杆菌中提取质粒 DNA,获得满足下游应用(酶切、测序、转染等)所需纯度和浓度的质粒。
用限制性内切酶在特定识别位点切割 DNA,产生黏性末端或平末端,用于基因克隆与重组载体构建。
用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳按分子量分离蛋白质,用于蛋白纯度鉴定、表达检测与分子量估算。
从转染后的混合细胞群中筛选出稳定整合的单克隆细胞株,并扩大培养,获得遗传背景一致的细胞群体。
用 T4 DNA 连接酶将酶切后的载体与插入片段连接成重组质粒,再转化入感受态大肠杆菌,获得含目的重组子的克隆。
检测样品中特定蛋白质的表达情况。
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